冷凍保存哺乳動(dòng)物細(xì)胞在生物學(xué)研究中非常有價(jià)值和普遍。為了防止技術(shù)原因(培養(yǎng)操作)使細(xì)胞污染或物理原因(培養(yǎng)箱故障)使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣。此外,長(zhǎng)期多次的培養(yǎng)和傳代,導(dǎo)致細(xì)胞在遺傳學(xué)性狀上的老化和分化都是促使在接收或生成新細(xì)胞系后首要考慮的適宜策略就是凍存細(xì)胞。低溫凍存對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要。細(xì)胞深低混保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于停止?fàn)顟B(tài),故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0℃到-20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),冰晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。
如何減少或者避免冰晶形成,如同凍存細(xì)菌時(shí)用的甘油,DMSO(二甲基亞砜)是一種滲透性保護(hù)劑,能夠降低細(xì)胞冰點(diǎn),減少冰晶的形成,減輕自由基對(duì)細(xì)胞損書,改變生物膜對(duì)電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。凍存液中加入后可以使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)的水分逐漸透出,從而減少了冰晶的形成,從而避免細(xì)胞的損傷。這就是為什么低溫凍存細(xì)胞時(shí)為什么要采用慢凍的一個(gè)重要原因。
一旦從生長(zhǎng)培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到冷凍培養(yǎng)基中,就要執(zhí)行慢凍的過程。盡管冷凍細(xì)胞系是通常執(zhí)行的程序,但是當(dāng)沒有合適的冷凍器縣時(shí),或者由于存在血清,額外洗滌或操作不當(dāng)時(shí),就會(huì)出現(xiàn)問題。當(dāng)然,這個(gè)問題是在細(xì)胞復(fù)蘇(快融)后才發(fā)現(xiàn)的,發(fā)現(xiàn)復(fù)蘇后的細(xì)胞大部分感者全部都是死細(xì)胞,甚至還有不容易發(fā)現(xiàn)的整個(gè)凍存過程的不當(dāng)導(dǎo)致的細(xì)胞分化。
針對(duì)上述細(xì)胞凍存過程中的痛點(diǎn),今天我們帶來NIPPON Genetics品牌的一款認(rèn)可的BambankerTM無血清細(xì)胞凍存液。BambankerTM細(xì)胞凍存液允許直接將細(xì)胞在-80℃或液氮中冷凍保存,從而避免了對(duì)額外設(shè)備的需求,并且也避免了耗時(shí)且復(fù)雜的梯度逐漸冷凍方案。
同時(shí),Bambanker是一款無血清、無動(dòng)物源且成分明確的即用型細(xì)胞凍存液,適用幾乎所有類型細(xì)胞株,包括原代細(xì)胞、干細(xì)胞、淋巴細(xì)胞以及常規(guī)細(xì)胞系等,該產(chǎn)品已在上百篇同行評(píng)審出版物中被引用,獲得全球用戶的認(rèn)可。目前,JCRB細(xì)胞庫(kù)用Bambanker凍存超過1400種不同細(xì)胞系,凍存超過5年后的細(xì)胞復(fù)蘇活率仍可達(dá)到80%以上。相比于傳統(tǒng)添加血清的細(xì)胞凍存方法,用Bambanker凍存細(xì)胞有很大的優(yōu)勢(shì)。
BambankerTM無血清細(xì)胞凍存液特點(diǎn):
Bambanker凍存液采用無動(dòng)物源配方,成分明確,避免支原體、病毒等不確定來源成分的污染
能滿足細(xì)胞在-80°C 或-196°C低溫條件下長(zhǎng)期穩(wěn)定保存
Bambanker為即用型細(xì)胞凍存液,無需稀釋、無需程序降溫步驟
Bambanker能有效提高復(fù)蘇后的細(xì)胞活率
GMP生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)
適用于所有細(xì)胞系
產(chǎn)品效期長(zhǎng),在2-10℃可保存2年
Bambanker凍存液的使用方法也非常簡(jiǎn)單,如下圖所示,無需程序降溫步驟,滿足細(xì)胞在-80℃條件下長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定保存。
BambankerTM相較于含血清凍存液的優(yōu)勢(shì):
所有BambankerTM產(chǎn)品均不含血清。含有血清的冷凍保存培養(yǎng)基具有回收率波動(dòng)和成分不確定的缺點(diǎn)。凍存于含血清的培養(yǎng)基中的細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性可能會(huì)受到批次之間血清差異的影響,因?yàn)榈鞍踪|(zhì)和其他生物分子的組成和濃度會(huì)隨每批血清而變化。解凍和使用這種含血清培養(yǎng)基的細(xì)胞時(shí),可能會(huì)導(dǎo)致問題。因?yàn)锽ambanker"的每種成分都經(jīng)過仔細(xì)定義,因此您可以放心,在不同時(shí)間存儲(chǔ)的細(xì)胞都將有一致的效率。
BambankerTM可防止不期望的分化:
不期望的細(xì)胞分化也可能是冷凍細(xì)胞長(zhǎng)期保存的一個(gè)問題。 所有Bambanker試劑均旨在盡可能地減少此問題。 對(duì)于特別麻煩的細(xì)胞,Bambanker不含DMSO的配方經(jīng)過特殊配制,可防止可能與含DMSO的冷凍保存試劑相關(guān)的問題。因此,請(qǐng)加入越來越多的實(shí)驗(yàn)室的選擇,使用Bambanker保護(hù)其細(xì)胞系!
BambankerTM無血清細(xì)胞凍存液家族:
BambankerTM引用文獻(xiàn)(部分):
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作為NIPPON Genetics在中國(guó)的區(qū)域總代理,靶點(diǎn)科技將為中國(guó)客戶提供全面的NIPPON Genetics的產(chǎn)品。
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