氯磷酸二鈉脂質體由同心磷脂雙層構成的人造球,該雙層包裹著含有氯膦酸鹽的PBS(磷酸鹽緩沖液)水溶液,脂質體是顆粒,在PBS中形成懸浮液,在儲存時會沉淀,在試管或燒瓶的底部形成沉淀,在對實驗動物給藥之前,應先搖晃懸浮液,以回收均勻的懸浮液。
一、作用原理:
兩親性磷脂分子在水中可以形成同心圓形式的磷脂雙分子層球體,磷脂雙分子層中間通過水相分隔。溶解在水溶液中的氯磷酸鹽在形成脂質體的過程中被包裹進磷脂雙分子層之間的水相中,游離的氯磷酸鹽不能自由的通過脂質體的磷脂雙分子層。隨著氯磷酸二鈉脂質體被巨噬細胞吞噬,在巨噬細胞溶酶體磷酸酶的作用下,溶解在脂質體水相中的氯磷酸鹽就可以被逐步釋放出來,并累積在細胞內,當其達到一定濃度時,巨噬細胞將會受到不可逆轉的損傷,從而進入凋亡過程。
二、使用方法:
?。?)將小鼠放在倒扣的飯盒內,從孔口拉出尾巴,小鼠的尾部有2條動脈和3條靜脈,2條動脈分別在尾部的背側面和腹側面,3條靜脈呈品字型分布,一般采用左右兩側的靜脈;隔日尾靜脈注射200μl產品。
?。?)行尾部靜脈注射時,以左手拇指和食指前后摁住鼠尾,留出約2cm一段,使皮膚緊張,靜脈更為充盈,右手持1ml針頭注射器,使針頭與靜脈平行(小于30°角),從尾巴的下1/4處進針,開始注入藥物時應緩慢,仔細觀察,如果無阻力,無白色皮丘出現(xiàn),說明已刺入血管,可正式注入藥物。
(3)有的實驗需連日反復尾靜脈注射給藥,注射部位應盡可能從尾端開始,按次序向尾根部移動,更換血管位置注射給藥。根據(jù)實驗要求制定注射日程,通過免疫組化或流式檢測巨噬細胞去除效率。